11月7日，中国田径协会路跑竞赛专家工作组组长，世界田径联合会（WA）及世界路跑协会（AIMS）国际B级丈量员闫俊涛对南京银行·2023南京马拉松赛事路线进行丈量，根据最终丈量结果，对本届赛事路线微调如下：

　　调整一：由原来的龙蟠路逆行进入玄武湖赛道调整为由龙蟠路顺行折返进入玄武湖赛道。

　　调整二：在姜家圩路段设置了折返点。

　　调整后的路线图

　　2023南京马拉松赛道全程42.195公里，起、终点为A到B设计。选手从南京奥体中心东门出发，途经大报恩寺、中华门、总统府、玄武湖、渡江胜利纪念馆、下关历史陈列馆、达摩古洞景区等城市景点地标，最终在燕子矶滨江公园完成冲线。